(1)D(2)A(3)E

(1)在 Macchiavello 包涵体染色法中，柠檬酸主要起分化作用。分化时间非常关键，时间过长会导致染色过浅，无法清晰显示包涵体；时间过短则分化不完全，背景会有杂质干扰。通常数秒钟的分化时间就能达到理想效果，既能去除多余的染料，又能保证包涵体的特异性染色不受影响，使包涵体与周围组织形成鲜明对比，便于观察。(2)碱性复红是 Macchiavello 包涵体染色法中的主要染色剂，用于使包涵体着色。染色时间需要足够长，才能确保碱性复红充分进入包涵体并与其中的成分结合，从而使包涵体呈现出明显的红色。30 分钟的染色时间通常能保证染色效果良好，使包涵体在显微镜下易于识别和观察。如果染色时间过短，可能导致包涵体染色不充分，颜色过浅，不利于准确判断。(3)Macchiavello包涵体染色法染色步骤：①中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水25，②蒸馏水稍洗，③用0.25%碱性复红水溶液染色30min，④直接用0.5%柠檬酸水溶液分化数秒钟，⑤蒸馏水洗2～3次，⑥放入1%亚甲蓝水溶液复染15～30s，⑦水洗2min，⑧95%乙酸及无水乙醇迅速脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。