(1)B(2)D(3)A(4)C(5)E

(5)聚酰胺柱层析中，化合物的洗脱顺序通常与其极性大小密切相关，极性较小的化合物往往先被洗脱出来。水-乙醇混合溶剂进行梯度洗脱时，随着乙醇比例的增加，洗脱力逐渐增强，能洗脱出的化合物极性也相应增大。A选项3，5，7-三羟基黄酮含有三个羟基，极性相对较大。B选项3，5-二羟基-7-O-葡萄糖基黄酮虽然含有两个羟基，但7位上的葡萄糖基能显著降低其极性，使得整体极性相对较小，因此可能首先被洗脱。C选项3，5，7，4'-四羟基黄酮含有四个羟基，极性较大。D选项3，5，4'-三羟基-7-O-葡萄糖基黄酮含有三个羟基和一个葡萄糖基，但羟基数量多于B选项，极性相对较大。E选项3，5，7，3'，5'-五羟基黄酮含有五个羟基，是这些选项中极性最大的。综上所述，根据聚酰胺柱层析的洗脱原理和化合物极性的大小关系，可以判断B选项3，5-二羟基-7-O-葡萄糖基黄酮由于其相对较小的极性，会首先被水-乙醇混合溶剂梯度洗脱出来。所以这道题选B。聚酰胺柱层析中，黄酮类化合物的洗脱顺序主要取决于游离羟基的数量、位置及是否成苷。游离羟基数目越多，吸附力越强，洗脱越晚；羟基成苷后吸附力显著降低。选项B含2个游离羟基（3、5位），7位成苷，吸附最弱，最先洗脱。选项D含3个游离羟基（3、5、4'位），7位成苷，因羟基数目多于B但少于A、C、E，且无邻位羟基增强吸附，故为第二洗脱。选项A含3个游离羟基（3、5、7位），其中5、7位为邻位羟基，吸附力强于D，洗脱顺序在D之后。选项C.（4个羟基）和E.（5个羟基）因羟基数目更多，吸附力最强，洗脱最晚。综上，第二被洗出的是D。所以这道题选D。聚酰胺柱层析中，化合物的洗脱顺序通常取决于其极性大小，极性较小的化合物会先被洗脱出来，极性较大的化合物则后被洗脱。水-乙醇混合溶剂进行梯度洗脱时，随着乙醇浓度的逐渐升高，洗脱力增强，能洗脱下极性较大的化合物。A选项3，5，7-三羟基黄酮结构中羟基数量相对较少，极性相对较小，因此在梯度洗脱过程中会较早被洗脱出来，符合题目中“第三被洗出”的描述（假设前两个被洗出的化合物极性更小）。B选项3，5-二羟基-7-O-葡萄糖基黄酮和D选项3，5，4'-三羟基-7-O-葡萄糖基黄酮，均含有葡萄糖基，增加了化合物的极性，因此它们的洗脱顺序会相对靠后。C选项3，5，7，4'-四羟基黄酮和E选项3，5，7，3'，5'-五羟基黄酮，由于羟基数量更多，极性更大，通常会在更高极性的洗脱条件下才被洗脱，因此洗脱顺序会更靠后。综合以上分析，这五种化合物中，3，5，7-三羟基黄酮的极性相对较小，会在较早的阶段被洗脱出来，符合题目中“第三被洗出”的条件。所以这道题选A。聚酰胺柱层析对黄酮类化合物的分离主要依赖其与聚酰胺间形成的氢键强度，羟基数目越多、游离羟基比例越高，吸附作用越强，洗脱越靠后。若羟基被糖苷化（如O-葡萄糖基取代），则无法形成氢键，吸附减弱，洗脱提前。选项C（3，5，7，4'-四羟基黄酮）含4个游离羟基，无糖苷取代，吸附力强于含糖苷的B（3个游离羟基）和D（3个游离羟基），但弱于E（5个游离羟基）；而A（3个游离羟基）因羟基数目少，洗脱更早。因此洗脱顺序为：A（最早）→B/D（糖苷取代，羟基数目少）→C（4个游离羟基）→E（最后）。第四被洗出的为C。黄酮类化合物在聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律：①黄酮类化合物分子中的酚羟基数目越多则吸附力越强，在色谱柱上越难以被洗脱；②当分子中酚羟基数目相同时，酚羟基所处位置易于形成分子内氢键，则其与聚酰胺的吸附力减小，易被洗脱下来；③分子内芳香化程度越高，共轭双键越多，则吸附力越强，故查耳酮要比相应的二氢黄酮吸附力强；④不同类型黄酮类，被吸附强弱的顺序为：黄酮醇>黄酮>二氢黄酮醇>异黄酮。